Search results for "ekspresijas sistēma"
showing 2 items of 2 documents
Smiltsērkšķu marafivīrusa kodēto proteīnu klonēšana, ekspresija un raksturošana
2022
Smiltsērķšu marafivīruss (SBuMV) ir iepriekš neraksturots, smiltsērkšķus inficējošs vīruss. Tam ir divas atklātās translācijas fāzes (ORF), kur ORF1 kodē poliproteīnu, kas satur četrus proteīnu domēnus, bet ORF2 kodē apvalka proteīnu (CP). Šajā darbā tika izveidotas ekspresijas plazmīdas SBuMV kodētajiem proteīniem, taču E. coli sistēmā izdevās ekspresēt un attīrīt tikai abas CP formas un proteāzes (PRO) domēnu. Tika pārbaudīta PRO aktivitāte, PRO šķelšanas saits un verificēta PRO deubikvitināzes (DUB) aktivitāte. SBuMV mažorais CP E. coli spēj pašsavākties vīrusam līdzīgajās daļinās (VLP), bet minorais CP veido agregātus. Koekspresijas rezultātā, ja abas CP formas ekspresē no vienas plazmī…
Melanokortīna otrā tipa receptora un tā palīgproteīna ekspresija rauga Pichia Pastoris ekspresijas sistēmā
2015
Darba ietvaros tika izveidots pPIC9K- MC2R-T4L ekspresijas konstrukts, kas tika ekspresēts P.Pastoris sistēmā. Western blot analīze uzrādīja nepieciešamās molekulmasas zonu. MC2R-T4L izdevās attīrīt uz His- un Ha-tag afinitātes kolonnām. Lai noteiktu funkcionāla MC2R struktūru, to nepiecieciešams ekspresēt kompleksā ar MRAP, tādēļ tika izveidoti vairāki MC2-MRAP konstrukti, ko tālāk izmantot proteīna ekspresijai P. Pastoris šūnās. To aktivitāte tika pārbaudīta zīdītāju šūnu līnijās nosakot cAMP daudzuma izmaiņas pēc stimulācijas ar ACTH (1-24). Iegūtie rezultāti bija nestabili, tādēļ tālākajos pētījumos tiks veikta radioaktīvā ACTH saistīšanas mērījumus. Darbs tika veikts no 2013.gada jūnij…